UNIDAD FORMATIVA 1. TÉCNICAS DE SEPARACIÓN DE ADN, ARN Y PROTEÍNAS DE MUESTRAS BIOLÓGICAS
UNIDAD DIDÁCTICA 1. OBTENCIÓN, MANIPULACIÓN Y PROCESAMIENTO DE MUESTRAS BIOLÓGICAS PARA ANÁLISIS DE ADN, ARN Y PROTEÍNAS
- Tipos de muestras para análisis de ADN, ARN y proteínas.
- - Extracción de ADN (a partir de sangre, tejidos o células en cultivo, células bucales,…)
- - Extracción de ARN (mediante tiocianato de guanidina, urea-cloruro de lítio, purificación de poli(A)-ARN,
- Determinación analítica. Perfil analítico. Cartera de servicios.
- - Determinación de ácidos nucleicos
- - Separación analítica y preparativa del ADN (electroforesis analítica, geles de agarosa, …)
- Errores más comunes en la manipulación de las muestras.
- - Identificación y etiquetado de las muestras
- - Contaminación (por RNAsas, DNA,…)
- - Degradación enzimática
- Características generales de la obtención y procesamiento de muestras para análisis de ADN, ARN y proteínas.
- - Obtención de ADN y ARN a partir de tejidos líquidos (anticoagular)
- - Inhibidores RNAsas
- Prevención de riesgos en la obtención, manipulación y procesamiento de muestras biológicas.
- - Recepción o toma de muestras. Medidas preventivas
- - Precauciones generales relativas al laboratorio
- - Precauciones durante el desarrollo del trabajo
- - Reglas de higiene personal
UNIDAD DIDÁCTICA 2. CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS PARA ANÁLISIS DE ADN, ARN Y PROTEÍNAS
- Etiquetado e identificación de las muestras.
- Sistemas y formatos de archivos. Sistemas de almacenamiento.
- Equipos de almacenamiento (-20ºC, - 80º C)
- Transporte de muestras (ADN: descongeladas, tubos estabilizadores ARN, tiempo de transporte recomendado 72 horas. ARN, congelado mediante agentes crioprotectores y con inhibidores de ARNAsas).
- Prevención de riesgos en la conservación y transporte de muestras biológicas.
- - Precauciones durante el desarrollo del trabajo
- - Reglas de higiene personal
- - Almacenamiento de muestras biológicas. Zonas de acceso restringido. Contenedores específicos. Manejo con EPIs
- - Transporte de material biológico. Sistema básico de embalaje. Identificación
UNIDAD DIDÁCTICA 3. BIOLOGÍA MOLECULAR: ADN, ARN Y PROTEÍNAS
- Composición molecular, estructura y función de los ácidos nucleicos.
- - Composición química y estructura de los ácidos nucleicos: Nucleótidos de importancia biológica y Factores que estabilizan la doble hélice
- - Funciones de los ácidos nucleicos
- Descripción de las enzimas asociadas a los ácidos nucleicos.
- - Endonucleasas (Tipo 1 y 2)
- - Polimerasas
- - Ligasas
- - Nucleasas
- - Fosfatasas
- - Quinasas
- - ARNasas
- Replicación del ADN.
- - Modo semiconservativo
- - Horqueta de replicación
- - Enzimas que intervienen en el proceso
- - Molécula accesoria: Iniciador
- Transcripción del ADN y su control.
- - Proceso: Cadena molde o antisentido. ARNm o transcripto primario. Enzima que dirige: polimerasa de ARN
- - Modificaciones postranscripcionales.
- Mecanismos de reparación del ADN.
- - Agentes genotóxicos y mecanismos de reparación del DNA
- - Reparación de dímeros de pirimidinas mediante fotoreactivación
- - Remoción de grupos metilo
- - Bases mal apareadas
- - Metilación del DNA
- - Reparación del DNA durante o después de su replicación
- - Reparación de cortes en ambas cadenas del DNA
- - Sistemas De reparación de DNA: NER (Nucleotide Excision Repair)
- - Mecanismos de reparación de DNA: BER (Base escisión Repair)
- Mutaciones del ADN, alteraciones en las proteínas que sintetizan y enfermedades asociadas.
- - Alteraciones que puede sufrir el ADN: Mismatch (mal apareamiento), Desaminación, Pérdida de bases, Unión covalente entre bases de la misma cadena, Unión de grupos alquilo, Ruptura de simple cadena (nick) y Ruptura de doble cadena
- - Alteraciones en las proteínas que se sintetizan y enfermedades asociadas. Desnaturalización
- Estructura y función de las proteínas.
- - Aminoácidos y neurotransmisores
- - Enlaces peptídicos, oligopeptidos y polipeptidos
- - Estructura primaria, secundaria , terciaría y cuaternaria
- - Funciones de las proteínas: estructural, reguladora, de transporte, de reserva, enzimática, mensajera y de receptores químicos
- Transcripción y traducción.
- - Moléculas implicadas en la transcripción y traducción de las proteínas
- - Fases de la transcripción de las proteínas
UNIDAD DIDÁCTICA 4. METODOLOGÍA APLICADA A LA SEPARACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
- Electroforesis.
- - Tipos de electroforesis: unidimensionales, bidimensionales y técnicas relacionadas.
- - Separación electroforética de las proteínas séricas. Patrones de normalidad y de alteración
- - Características del material y de los reactivos. Averías o disfunciones
- Técnicas cromatográficas.
- - Características de los equipos. Condiciones de uso y mantenimiento
- - Calibración. Averías o disfunciones
- - Características del material y de los reactivos
- Técnicas de inmunodetección.
- - Inmunocitoquímica
- - Western blot
- - Inmunoprecipitación
- - Co-inmunoprecipitación
- - Pull-down
- - TUNEL
- Espectrometría de masas.
- - Fundamento y aplicaciones.
- - Características de los equipos.
- - Condiciones de uso y mantenimiento. Calibración. Averías o disfunciones.
- - Características del material y de los reactivos.
- Tecnología de microarrays y chips de proteínas.
- - Microarrays de ADN: Diseño de un microarrays de ADN. Tipos
- - Microarrays de Proteínas: Diseño de un microarrays de proteínas. Tipos
- - Microarrays de Carbohidratos: Diseño de microarrays de carbohidratos. Aplicaciones
- - Microarrays de Células
- - Microarrays de Tejidos
- - Perspectivas de mercado de los microarrays y biochips en el área de salud humana
- Bioinformática. Bases de datos de proteómica.
- - Genómica funcional
- - Relación entre la biología y la informática
- - Biochips
- - Bioinformática
- - Bibliografía
